В связи с длительностью размножения вируса гриппа в культуре клеток работа со штаммом WSN ограничена изучением инфекционности его в течение трех пассажей. В этих опытах важен был принцип изменения инфекционности культурального вируса под влиянием ЭИ. Обнаружено, что инфекционность вируса WSN, обработанного ЭИ 1:5000 в течение 30, 60 и 120 мин, выше инфекционности контрольного вируса примерно на 21g ЦДД50/0Д Это соотношение сохраняется в течение трех пассажей. До сих пор усиление инфекционной активности ортомиксовирусов удавалось получать применением различных факторов, действующих на определенные этапы взаимодействия вируса с клеткой. Положительный эффект оказывали вещества, улучшающие проницаемость клеточной оболочки, а также ингибиторы продукции интерферона. При анализе действия ЭИ необходимо было исключить подобного рода влияние его на процесс репродукции вируса.
Для объяснения действия этиленимина — широко известного алкилирующего соединения из группы супермутагенов — был необходим иной путь. Но он требовал исключить указанного рода влияние ЭИ на репродукцию вируса. Дело в том, что в примененной постановке опытов использовано заражение куриных эмбрионов или культуры ткани вирусов после экспозиции in vitro с различными концентрациями ЭИ. В этом случае мутагеном обрабатывался внеклеточный вирион, но полностью исключить опосредованное действие его на клетку было трудно. Поэтому в серии следующих экспериментов предполагали получить некоторые доказательства непосредственного взаимодействия ЭИ с вирусом гриппа. Для начала особое внимание было обращено на возможные морфологические изменения вириона под влиянием слабой концентрации ЭИ. Контакт вируса с мутагеном продолжался 1 ч при комнатной температуре, после чего вирионы освобождали от ЭИ двукратным отмыванием в супер-центрифуге типа ОИ - 102 МОМ - Ж - 120 при 40 000 об/мин, осадок ресуспендировали в 1 мл физиологического раствора.
Для объяснения действия этиленимина — широко известного алкилирующего соединения из группы супермутагенов — был необходим иной путь. Но он требовал исключить указанного рода влияние ЭИ на репродукцию вируса. Дело в том, что в примененной постановке опытов использовано заражение куриных эмбрионов или культуры ткани вирусов после экспозиции in vitro с различными концентрациями ЭИ. В этом случае мутагеном обрабатывался внеклеточный вирион, но полностью исключить опосредованное действие его на клетку было трудно. Поэтому в серии следующих экспериментов предполагали получить некоторые доказательства непосредственного взаимодействия ЭИ с вирусом гриппа. Для начала особое внимание было обращено на возможные морфологические изменения вириона под влиянием слабой концентрации ЭИ. Контакт вируса с мутагеном продолжался 1 ч при комнатной температуре, после чего вирионы освобождали от ЭИ двукратным отмыванием в супер-центрифуге типа ОИ - 102 МОМ - Ж - 120 при 40 000 об/мин, осадок ресуспендировали в 1 мл физиологического раствора.
