Epidemia.Biz

Вторая группа отнесена к ts - мутантам, они отличаются мелкобляшечным фенотипом и повышенной термолабильностью. В третьей группе УФ - мутантов обнаружены вирусы, бляшкообразование которых в отличие от исходного штамма и других групп мутантов стимулировалось в присутствии экмолина в агаровом покрытии. Стимулируемые экмолином мутанты отличались от вирусов, не стимулируемых им, хроматографическим профилем при элюции на колонках с ДЭАЭ-целлюлозой. Стимулируемые экмолином УФ-мутанты отличались более прочной связью с ионообменником, и для их элюции требовалась большая ионная сила. Стимуляция бляшкообразования экмолином коррелировала у этих мутантов с высокой чувствительностью к интерферону.

Радиомутагенез вирусов человека и животных пока ограничен рамками исследования принципиальной возможности получения УФ-мутации при различных способах воздействия на вирус, а также поиска коррелятивных связей измененных свойств.
Первые УФ-мутанты вируса гриппа, отличающиеся от исходного штамма степенью элюции с эритроцитов, были получены S. Bjorkman, F. Harsfall.

Таким образом, действие ЭИ на морфологию вириона не ограничивается нарушением его поверхностной структуры при первичном соприкосновении их. Кажется, что ЭИ достигает его генетического аппарата, так как вирионы с измененной морфологией обнаруживаются и в потомстве вируса, обработанного этим уникальным соединением. Данная гипотеза должна в дальнейшем изучаться с сопоставлением более точных параметров измерения размера вирионов, площади поверхности их, с гемагглютинирующими и нейрамини-дазными активностями.

Таким образом, с помощью электронной микроскопии представлены доказательства влияния ЭИ на морфологическую структуру вирионов в опытах in vitro. Правда, по приведенным фотографиям трудно представить глубину ран, нанесенных ЭИ на тело вириона. Пока можно говорить о повреждении поверхностных структур, а вовлечение в реакцию генетического аппарата, вируса, т. е. связь между описанной морфологической дезинтеграцией вирионов и усилением их инфекционной активности, должно было изучаться в дальнейших экспериментах. Требовались морфологические исследования потомства пострадавших от ЭИ вирионов. Следует особо отметить, что изменение морфологии вирионов воздействием каких-либо мутагенов ранее не изучалось. Электронно-микроскопические фотоиллюстрации, приводимые здесь, являются первыми документами изменчивости вируса по данному признаку.

Вирус, не обработанный ЭИ, концентрировали таким же образом. На пленку - подложку вирус наносили по методу «тепловой адсорбции». Электронное микроскопирование проводили в микроскопе В - 513/А Tesla.
Морфологические исследования вирионов гриппа до и после обработки ЭИ проводились с теми же двумя штаммами — Алма - Ата 770/64 и WSN. При подборе дозы ЭИ для данных опытов исходили из концентраций мутагена, вызывающих изменения биологических свойств вирусов. Разведение 1:5000 оказалось наименьшей концентрацией его, способной вызывать стойкие изменения инфекционной активности изучаемых штаммов.

В связи с длительностью размножения вируса гриппа в культуре клеток работа со штаммом WSN ограничена изучением инфекционности его в течение трех пассажей. В этих опытах важен был принцип изменения инфекционности культурального вируса под влиянием ЭИ. Обнаружено, что инфекционность вируса WSN, обработанного ЭИ 1:5000 в течение 30, 60 и 120 мин, выше инфекционности контрольного вируса примерно на 21g ЦДД50/0Д Это соотношение сохраняется в течение трех пассажей. До сих пор усиление инфекционной активности ортомиксовирусов удавалось получать применением различных факторов, действующих на определенные этапы взаимодействия вируса с клеткой. Положительный эффект оказывали вещества, улучшающие проницаемость клеточной оболочки, а также ингибиторы продукции интерферона. При анализе действия ЭИ необходимо было исключить подобного рода влияние его на процесс репродукции вируса.

Действие различных концентраций ЭИ на вирус гриппа определяли в опытах на куриных эмбрионах повышению инфекционности. По ряду причин наиболее интересным было именно последнее обстоятельство. Представлялось, что кажущееся отсутствие экспериментальных данных по индуцированию мутации с повышенной патогенностью может быть объяснено увлечением исследователей так называемой «селекцией полезных форм». При этом предпочтительно отбираются и изучаются мутации со сниженными биологическими свойствами. В смысле практической ценности авирулентные варианты действительно имеют то главное преимущество, что могут в перспективе использоваться для изготовления живых вакцин, значение которых в профилактике вирусных заболеваний невозможно умалить ничем.

Вирус, репродуцирующийся из некоторых клеточных органоидов, обработанных ЭИ, имел ряд измененных свойств, уменьшилась его инфекционная активность и патогенность для мышей. Забегая вперед и сравнивая эти данные с результатами опытов по изучению действия ЭИ на внеклеточный вирион, можно констатировать, что алкилирующее соединение, по всей вероятности, вызывает неодинаковый эффект при контакте с вирусом на разном уровне его структурной организации. Это обстоятельство расширяет перспективу изучения действия ЭИ на вирус гриппа.

Анализ мутагенного действия 1,4 - БДАБ имеет особый интерес и в связи с анализом специфики действия нитрозо - 138 соединений. Дело в том, что диазометан, образующийся из нитрозометилмочевины, дважды содержится в молекуле 1,4 - БДАБ. По мнению большинства исследователей, именно диазометан и другие диазоалканы, вторично возникающие из N - нитрозосоединений, являются главными носителями мутагенного эффекта. Но опыты на дрозофиле показали много специфики и мутационного механизма этих соединений. Некоторые несходства обнаружены и по мутагенному эффекту.
Г. Д. Засухина и И. А.
Обсуждаемые ниже результаты действия 1,4 - БДАБ на ортомиксовирусы являются пока единственными на этой модели. Исследования проводились с клонированным вирусом WSN, который образует при пермиссивной температуре.
Из данных, представленных в таблице 25, видно, что снижение биологической активности вируса под влиянием 1,4 - БДАБ зависит от концентрации мутагена.